بررسی اثر القاء‌کنندگی لاکتوز و IPTG بر بیان ژن اینتر فرون بتا 1 بی در باکتری (Escherichia coli BL21 (DE3
نویسندگان
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: پروموتر [1] lac یک ژن تنظیم کننده پروکاریوتی بیان پروتئین نوترکیب در Escherichia coli میباشد. این پروموتر توسط لاکتوز و یا آنالوگ شیمیایی آن[2] IPTG القا میشود. در این تحقیق تأثیر لاکتوز و IPTGبر میزان بیان ژن اینترفرون بتا ، مقایسه شده است. مواد و روش ها: باکتری (Escherichia coli BL21 (DE3 کلون شده با ژن اینترفرون بتا کشت داده شد و با اضافه کردن غلظت مشخصIPTG و لاکتوز به طور جداگانه و یا با یکدیگر، بیان پروتئین القا گردید. میزان پروتئین اینترفرون تولید شده اندازهگیری شد. یافته ها: میزان بیان پروتئین اینتر فرون بتا 1 بی با استفاده از 2/0 % لاکتوز وIPTG 5/0 میلیمولار بهطور همزمان نسبت به هر کدام از القاءکنندهها به تنهایی افزایش داشت و برابر با 34% کل پروتئینهای تولید شده توسط باکتری اشریشیاکلی نوترکیب بود. نتیجه گیری: در این تحقیق، با استفاده همزمان لاکتوز وIPTG ، در مقایسه با هر کدام از این القاء کنندهها به تنهایی، میزان بیشتر پروتئین اینترفرون بتا 1 بی با هزینه کمتر تولید شد. [1] Lactose [2] Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside
منابع مشابه
Exacerbation of substrate toxicity by IPTG in Escherichia coli BL21(DE3) carrying a synthetic metabolic pathway
BACKGROUND Heterologous expression systems based on promoters inducible with isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG), e.g., Escherichia coli BL21(DE3) and cognate LacI(Q)/P(lacUV5)-T7 vectors, are commonly used for production of recombinant proteins and metabolic pathways. The applicability of such cell factories is limited by the complex physiological burden imposed by overexpression of t...
متن کاملGenomic and transcriptomic landscape of Escherichia coli BL21(DE3)
Escherichia coli BL21(DE3) has long served as a model organism for scientific research, as well as a workhorse for biotechnology. Here we present the most current genome annotation of E. coli BL21(DE3) based on the transcriptome structure of the strain that was determined for the first time. The genome was annotated using multiple automated pipelines and compared to the current genome annotatio...
متن کاملHigh-level production of membrane proteins in E. coli BL21(DE3) by omitting the inducer IPTG
BACKGROUND For membrane protein production, the Escherichia coli T7 RNA polymerase (T7 RNAP)-based protein production strain BL21(DE3) in combination with T7-promoter based expression vectors is widely used. Cells are routinely cultured in Lysogeny broth (LB medium) and expression of the chromosomally localized t7rnap gene is governed by the isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) inducibl...
متن کاملComplete Genome Sequence of Escherichia coli BLR(DE3), a recA-Deficient Derivative of E. coli BL21(DE3)
Escherichia coli BLR(DE3) is a commercially available recA-deficient derivative of BL21(DE3), one of the most widely used strains for recombinant protein expression. Here, we present the full-genome sequence of BLR(DE3) and highlight additional differences with its parent strain BL21(DE3) which were previously unreported but may affect its physiology.
متن کاملThe toxicity of recombinant proteins in Escherichia coli: a comparison of overexpression in BL21(DE3), C41(DE3), and C43(DE3).
Two mutant strains of Escherichia coli BL21(DE3), called C41(DE3) and C43(DE3) and originally described by Miroux and Walker, are frequently used to overcome the toxicity associated with overexpressing recombinant proteins using the bacteriophage T7 RNA polymerase expression system. Even when the toxicity of the plasmids is so high that it prevents transformation in the strain BL21(DE3), the to...
متن کاملبهینهسازی کدونی و مقایسهی بیان فاکتور رشد عصبی بتا انسانی (β-NGF) بصورت نوترکیب در میزبانهای باکتریایی( BL21(DE3 و BL21(DE3)pLysS
فاکتور رشد عصبی بتا (β-NGF) برای اولین بار بدلیل نقش حیاتی‌اش در رشد و بقای سلولهای عصبی مورد مطالعه قرار گرفت. این پروتئین که به خانواده‌ی نوروتروفین‌ها تعلق دارد در درمان بیماری‌های تخریب عصبی نظیر آلزایمر دارای نقش قابل ملاحظهای میباشد. بدین منظور، β-NGF انسانی نوترکیب برای اولینبار در ایران در دو سویهی متفاوت باکتری E.coli بیان شد. از آنجاییکه β-NGF در ساختار فعال و عملکردی خود دارای س...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 7 شماره None
صفحات 9- 16
تاریخ انتشار 2017-09
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023